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免疫磁珠试剂应用介绍
来源:[uar联合应用试剂]   发布日期:[2015/4/28]    共阅[2949]

免疫磁珠(ImpetiCbead,IMB简称磁珠),是发展起来的一项新的免疫学技术,它将固化试剂特有的优点与免疫学反应的高度特异性结合于一体,以免疫学为基础,渗透到病理、生理、药理、微生物、生化以及分子遗传学等各个领域,其在免疫检测、细胞分离、生物大分子纯化和分子生物学等方面得到了越来越广泛的应用。

免疫分析是一项利用了抗原-抗体的特异性反应来对分析物进行检测的技术。一些最基础的免疫检测技术包括:化学发光免疫分析(CLIA)、酶联免疫分析(ELISA)、荧光免疫分析(FIA)、放射免疫分析(RIA);而这些免疫分析,不仅包含了对活性原料的筛选,也包换对分离载体和信号物质的选择。国内的免疫分析发展到现在,定量免疫分析逐渐取代半定量免疫分析。化学发光免疫分析由于它的无毒,无反射性,并具有高灵敏度等特点,逐渐被大家认可并广泛使用。

来源:www.uarlab.com  uar联合应用试剂-国家科技支撑计划科研用试剂

一个高效率的免疫分析,离不开优质的载体。免疫磁珠因为其快速,稳定,高灵敏度,高包被效率,高比表面积等特点在现在免疫分析中广泛使用,并使得免疫分析向自动化发展得到了实现。

免疫磁珠应用

免疫磁珠分选

免疫磁珠细胞分选方法可以在几分钟内从复杂的细胞混合物中分离出很高纯度的细胞。

把细胞用超级顺磁性微型磁珠特异性地标记,磁性标记完后,把这些细胞通过一个放在强而稳定磁场中的分选柱。分选柱里的基质造成一个高梯度磁场。被磁性标记的细胞滞留在柱里而未被标记的细胞则流出。当分选柱移出磁场后,滞留柱内的磁性标记细胞就可以被洗脱出来,这样就完全可以获得标记和未标记的两个细胞组份。

由于微型磁珠的体积极小,所以不会对细胞造成机械性压力,而且使孵育时间短,操作过程快。

免疫磁珠法分离细胞原理: 免疫磁珠法分离细胞是基于细胞表面抗原能与连接有磁珠的特异性单抗相结合,在外加磁场中,通过抗体与磁珠相连的细胞被吸附而滞留在磁场中,无该种表面抗原的细胞由于不能与连接着磁珠的特异性单抗结合而没有磁性,不在磁场中停留,从而使细胞得以分离。

免疫磁珠法分为正选法和负选法: 正选法-磁珠结合的细胞就是所要分离获得的细胞  负选法-磁珠结合不需要的细胞,游离于上清液的细胞为所需细胞 。

一般而言,负选法比正选法的磁珠用量大

磁珠: 大小在0.1-0.45mm 包被了生产的高质量单抗磁珠已为白细胞亚群的分选所优化 将包被了特异性单抗的BD IMag磁珠加入细胞悬液,磁珠特异性地与有相应抗原的细胞亚群结合,通过分离得到的连有磁珠的细胞可直接用于功能试验和用流式细胞仪检测。  磁分离细胞的重要指标是:  纯度和得率,这取决于磁珠所连接单抗的特异性和磁珠大小(磁性),然而太小的磁珠得率不高,太大的磁珠又会影响细胞活性,也无法直接上流式。

磁珠用于核酸提取

通过对磁珠进行一定的包被(如硅基、氨基、羧基等),从而可以实现对核酸的高通量、自动化提取,这一技术产生于20世纪80年代,已经有了成熟的试剂盒并形成为产业。随着基因检测、个性化给药、产前诊断等的普及,在生物行业各领域都追求高通量、自动化的今天,传统DNA提取方法的局限愈来愈明显,而磁珠法DNA提取的优势则愈来愈明显:

①能够实现自动化、大批量操作,已有96孔的核酸自动提取仪,用一个样品的提取时间即可实现对96个样品的处理,符合生物学高通量的操作要求,使得传染性疾病爆发时能够进行快速及时的应对,这一特点使得传统方法望尘莫及;

②操作简单、用时短,整个提取流程只有四步,大多可以在36-40分钟内完成;

③安全无毒,不使用传统方法中的苯、氯仿等有毒试剂,对实验操作人员的伤害减少到最少,完全符合现代环保理念;

④磁珠与核酸的特异性结合使得提取的核酸纯度高、浓度大。

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